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发布时间：2013-12-14 16:17所属分类：基础学论文浏览：1次加入收藏
流感嗜血杆菌（Hemophilusinfluenzae，Hi）是一种苛养革兰阴性菌，常寄居于正常人呼吸道，当人机体抵抗力下降时，可引起人类呼吸道感染，儿童原发呼吸道感染之后可以继发本菌引起的中耳炎、脑膜炎和菌血症等。[摘要]目的了解海口地区患儿感染流感嗜血杆菌的
流感嗜血杆菌（Hemophilusinfluenzae，Hi）是一种苛养革兰阴性菌，常寄居于正常人呼吸道，当人机体抵抗力下降时，可引起人类呼吸道感染，儿童原发呼吸道感染之后可以继发本菌引起的中耳炎、脑膜炎和菌血症等。[摘要]目的了解海口地区患儿感染流感嗜血杆菌的分布情况及其耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集海口地区2010-2011年住院患儿2730份临床送检标本中分离的不重复流感嗜血杆菌158株，用头孢硝噻吩（Nitrocefin）纸片法测定其B-内酰胺酶；药敏试验采用纸片扩散法（K-B法），结果按临床实验室标准协会（CLSI）2010年版标准判读，采用WHONET5.6软件进行耐药性分析。结果158株流感嗜血杆菌主要分离自痰标本125株（占79.1%）；其次为咽拭子18株（占11.4%）、脑脊液5株（占3.2%）、血培养4株（占2.5%）、其他标本6株（占3.8%）。B-内酰胺酶检测阳性率为9.5%（15/158），氨苄西林的耐药率为10.8%（17/158）；其中产B-内酰胺酶株对氨苄西林全部耐药，非产B-内酰胺酶株中有2株对氨苄西林显示耐药，但两种方法对氨苄西林的耐药性检出差异无统计学意义（X2=0.15，P>0.05）。该菌对复方新诺明的耐药率高达74.1%，对其他常用抗菌药物的耐药率均在10%左右。结论流感嗜血杆菌在呼吸道标本中分离率最高，复方新诺明已不能用于该菌引起的感染治疗，氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢他啶、左氧氟沙星、阿奇霉素对该菌具有较高的抗菌活性，可作为临床治疗的首选药物。
[关键词]流感嗜血杆菌,B-内酰胺酶,耐药性
随着流感嗜血杆菌分离率的不断提高和其耐药性的不断上升，其致病性已受到普遍关注。现对2010-2011年海口地区儿童感染的流感嗜血杆菌进行回顾性分析，现报道如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
1.1.1标本来源收集2010年1月-2011年12月海口地区住院患儿临床送检标本2730份，包括痰液、咽拭子、血液、脑脊液、胸腹水等标本，共分离非重复流感嗜血杆菌158株。
1.1.2仪器及试剂全自动细菌鉴定仪分析仪VITE32及配套试剂，购自法国梅里埃公司。
1.1.3药敏纸片和培养基氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢他啶、左氧氟沙星、阿奇霉素、复方新诺明和V+X、V、X因子、头孢硝噻吩（Nitrocefin）纸片为英国Oxoid公司产品；巧克力培养基和嗜血杆菌试验培养基（HTM）药敏平板购自广州迪景生物有限公司，质控菌株为ATCCA9247。
1.2方法
1.2.1细菌培养和鉴定标本接种于巧克力平板，置5%二氧化碳（CO2）、35℃培养箱培养18-24h，挑取透明或半透明、扁平、湿润的露滴状疑似菌落做革兰染色和卫星试验，同时进行V、X、X+V因子需求试验进行筛选，全部菌株用VITEK32系统鉴定到种。
1.2.2B-内酰胺酶测定用Nitroeefin纸片按说明书测定被试菌株的B-内酰胺酶。
1.2.3药敏试验采用临床实验室标准协会（CLSI）推荐的纸片扩散法（Kirby-Bauer）进行，根据CLSI2010年颁布的判断标准进行药敏结果判断。
1.3统计学方法采用世界卫生组织（WHO）提供的WHONET5.6软件进行耐药性统计分析，耐药率比较采用SPSS11.0软件进行X2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1流感嗜血杆菌检出分布情况158株流感嗜血杆菌主要分离自痰标本125株，占79.1%；其次为咽拭子18株（占11.4%）、脑脊液5株（占3.2%）、血标本4株（占2.5%）和其他标本6株（占3.8%）。见表1。
2.2B-内酰胺酶检出情况158株流感嗜血杆菌中，用Ni-trocefin纸片法检测有15株产B-内酰胺酶，产酶率为9.5%（15/158），药敏纸片法检测氨苄西林的耐药率为10.8%（17/158）；其中产酶株对氨苄西林全部耐药，非产酶株中有2株对氨苄西林显示耐药，但两种方法检测氨苄西林的耐药性比较差异无统计学意义（X2=0.15，P>0.05）。
2.3药敏结果158株流感嗜血杆菌对复方新诺明的耐药率高达74.1%，对其他6种常用抗菌药物均呈较低的耐药水平，耐药率均<11%。见表2。
3.讨论
流感嗜血杆菌是儿童呼吸道感染的常见的条件致病菌，但当患儿机体免疫力低下时可进一步引起败血症、脑膜炎等严重全身性感染。本组数据显示：2730份患儿临床送检标本中共分离非重复流感嗜血杆菌158株，阳性率为5.8%，因该菌人工培养时需要特殊的V因子和X因子，因此培养较为困难，导致该菌临床检出率较低。本研究结果可见流感嗜血杆菌主要分离自痰标本，高于许浦生等报道；其次为咽拭子、脑脊液和血标本等。
本研究药敏结果显示，流感嗜血杆菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、头孢呋辛、头孢他啶、阿奇霉素的耐药率均小于11%，这些药物对流感嗜血杆菌具有较好的抗菌活性，可作为临床治疗的首选药物。阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢他啶对B-内酰胺酶均有抑制或抵抗作用，但作用方式有区别，克拉维酸是B-内酰胺酶不可逆的竞争型抑制剂；头孢呋辛属第二代头孢菌素，对多种B-内酰胺酶较稳定；头孢他啶属第三代头孢菌素，对B-内酰胺酶高度稳定，三者随着对B-内酰胺酶稳定性的升高，对流感嗜血杆菌的敏感率也相应升高，分别为89.9%、90.5%、93.0%，此数据可作为抗菌药物选择参考。
国内外对流感嗜血杆菌的耐药性研究始于20世纪70年代，发现耐氨苄西林的主要耐药机制是细菌产生了质粒介导的B-内酰胺酶，80年代初发现了不产B-内酰胺酶的氨苄西林耐药株。其耐药率呈现出明显的地区差别，在2.3%-58%之间，并有逐年上升的趋势。本研究结果显示对耐氨苄西林耐药率为10.8%，与俞桑洁等和汪复等的报道接近，但明显低于陈慧莉等和柯永坚等的报道。该菌B-内酰胺酶的产生率为9.5%，明显低于胡艳华等的报道，药敏显示B-内酰胺酶阳性株对氨苄西林全部耐药，有2株B-内酰胺酶阴性而对氨苄西林耐药（BLNAR）菌株出现，但两种方法对氨苄西的耐药性检出无差异，因此用B-内酰胺酶检测来快速预测对氨苄西林的耐药性还是可行的。
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