医学论文范文参考氯雷他定片含量测定方法的改进
发布时间：2014-07-31 17:34所属分类：基础学论文浏览：1次加入收藏
氯雷他定片是抗组胺药，用于缓解过敏性鼻炎有关的症状，亦适用于缓解慢性荨麻疹及其他过敏性皮肤病的症状[1-3]。现行标准用高效液相色谱法测定含量，笔者在检验工作中发现，现行标准的进样浓度偏高，其后果易造成色谱柱超载，且流动相中磷酸盐的浓度偏高[4-5
氯雷他定片是抗组胺药，用于缓解过敏性鼻炎有关的症状，亦适用于缓解慢性荨麻疹及其他过敏性皮肤病的症状[1-3]。现行标准用高效液相色谱法测定含量，笔者在检验工作中发现，现行标准的进样浓度偏高，其后果易造成色谱柱超载，且流动相中磷酸盐的浓度偏高[4-5]，易损伤仪器和色谱柱，据此本文对现行方法进行了改进：降低进样浓度为原浓度的1/15，降低磷酸盐浓度为原浓度的1/4，实验证明此法可行，可作为氯雷他定片的含量测定方法。
[摘要] 目的 改进氯雷他定片的含量测定方法。 方法 采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)， 柱温为室温，流动相为磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钾0.57 g，加水800 mL使溶解，用磷酸调节pH值为6.0，加水至1 000 mL)-甲醇(20∶80)，检测波长247 nm，流速为1.0 mL/min，进样体积为10 μL， 进样浓度为16 μg/mL。 结果 降低进样浓度及流动相中盐的比例后，氯雷他定色谱峰型对称，符合系统适应性要求，进样量在0.031 96～0.639 20 μg范围内与峰面积有良好的线性关系(r = 0.999 99，n = 6)，高、中、低3种浓度的平均加样回收率为99.4%(RSD = 0.58%，n = 9)。 结论 该法结果准确可靠、重现性好，有利于延长泵及色谱柱的使用寿命，可作为氯雷他定片的含量测定方法。
[关键词] 医学论文范文参考,氯雷他定片,进样浓度,含量测定,回收率
1 仪器与试药
Waters 2695-2489高效液相色谱仪;Empower 2工作站;氯雷他定对照品(批号：100615-200602，中国药品生物制品检定所);氯雷他定片(上海先灵葆雅制药有限公司，批号 10ERXF1020;山东罗欣药业股份有限公司，批号：110927;海南新世通制药有限公司，批号：110502);甲醇为色谱纯;磷酸氢二钾、磷酸均为分析纯;水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Kromasil C18(4.6 mm×150 mm，5 μm);流动相：磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钾0.57 g，加水800 mL使溶解，用磷酸调节pH值为6.0，加水至1 000 mL)-甲醇(20∶80);流速：1.0 mL/min;柱温：室温;检测波长：247 nm;进样体积为10 μL;理论塔板数以氯雷他定峰计算不低于2 000;拖尾因子：1.02;氯雷他定与相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品贮备溶液 精密称取氯雷他定对照品63.92 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.2 对照品溶液 精密量取对照品储备溶液25 mL，置100 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.3 供试品溶液 取供试品20片，精密称定，研细，取细粉适量(约相当于氯雷他定10 mg)，精密称定，置50 mL量瓶中，加流动相适量，振摇溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置25 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得[6-8]。
2.3 专属性试验
取氯雷他定片细粉4份(每份约相当于氯雷他定 10 mg)，分别经以下条件处理：(1)加入1.0 mol/L的盐酸溶液5 mL破坏后，再加入1.0 mol/L的氢氧化钠溶液5 mL中和至中性;(2) 加入1.0 mol/L的氢氧化钠溶液5 mL破坏后，再加入1.0 mol/L的盐酸溶液5 mL中和至中性;(3)在电炉上直火加热至片粉显微棕色;(4)经4 000 Lx光照24 h。取上述经酸、碱、强热及光照破坏的产物，照“2.2.3”项下制备供试品溶液，记录色谱图。结果表明：氯雷他定与各降解产物分离良好，分离度均大于 1.5。见图1、2、3、4、5。
2.4 线性关系考察
精密量取对照品储备液25 mL，置100 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密量取1.0、2.0、5.0、10.0、15.0和20.0 mL，分别置于50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。进样10 μL，测定峰面积。以进样量(μg)为横坐标X、峰面积为纵坐标Y绘制标准曲线，得回归方程为Y = 2 296 747.35X - 715.40，r = 0.999 99(n = 6)。表明氯雷他定进样量在0.031 96～0.639 20 μg范围内与峰面积有良好的线性关系。
2.5 精密度试验
取对照品溶液，按“2.1项下方法”连续重复进样5次，考察峰面积变化，结果RSD值为0.20%，表明仪器的精密度良好，能满足测定要求。
2.6 稳定性试验
取同一批供试品溶液，在室温条件下放置，分别在0、4、8、12、24 h测定，平均峰面积为365 430，RSD值为0.31%(n = 5)。表明供试品溶液至少在24 h内稳定。
2.7 重复性试验
取同一批号的氯雷他定片(批号：10ERXF1020)，按“2.2.3”项下制备供试品溶液5份，依法测定，RSD值为0.45%(n = 5)，表明该方法重复性良好。
2.8 回收率试验
精密称取已知含量的氯雷他定片(批号：10ERXF1020)细粉适量(相当于氯雷他定5 mg)9份，分为3组，每组分别精密加入对照品贮备液6、8、10 mL，配成低、中、高3个浓度，按“2.2.3”项下制备供试品溶液，测定回收率。见表1。 2.9 样品测定
取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，进样测定，记录色谱图，按外标法计算含量。本法与现行方法测定结果进行比较，结果显示，两法的测定结果基本一致。见表2。
3 讨论
3.1 进样浓度的选择
高效液相色谱分析中，进样量不宜过大，以免色谱柱超载或检测器超限，本法选用“2.4”项下标准曲线的中间浓度为进样浓度，响应值的重现性良好。本法的浓度用岛津UV-2550紫外分光光度计测定，吸收度约为0.6，而现行标准测定浓度的吸收值因检测器超限而无法显示数据。
3.2 流动相的选择
《中华人民共和国药典》2010年版二部新增关于流动相的选择原则是：应尽可能少用含有缓冲液的流动相，必须使用时，应尽可能选用含较低浓度缓冲液的流动相[9]。笔者曾选用不加盐的流动相甲醇∶水(80∶20)、乙腈∶水(80∶20)进行考察，结果显示主峰不为分离峰;分别用现行方法及本法的高、低两种磷酸盐浓度进行比较，色谱峰除保留时间有差异外，分离效果均良好，故选用低浓度的缓冲盐溶液作为流动相，将缓冲盐溶液给仪器和色谱柱带来的损害降至最低;本研究还曾选用乙腈代替本法流动相中的甲醇进行试验，柱效及峰高虽提高至原来的2倍，但考虑到本法已经达到系统适用性的要求，且乙腈的毒性和成本较大，所以不建议使用。
3.3 专属性
经破坏试验验证，本法的氯雷他定主峰与降解产物达到良好的分离，能够排除降解产物的干扰，专属性强且峰型良好，拖尾因子为1.02，可以有效地控制氯雷他定片的质量。
本法测定氯雷他定片的含量，具有较宽的线性范围和较高的回收率，结果可靠、准确、重现性好，色谱条件符合系统适用性要求，有利于延长泵及色谱柱的使用寿命，与现行方法测定结果比较，两法的测定结果基本一致，可以作为氯雷他定片的含量测定方法。
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